NobleRyder G418溶液(geneticin,20mg/ml)
NobleRyder G418溶液(geneticin,20mg/ml) 即用型液體試劑 C3802-10ml
G418溶液(geneticin,20mg/ml)
產(chǎn)品簡介：
新霉su(geneticin, G418)又稱遺傳霉素，是一種氨基糖苷類抗生素, 是*常用的細胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染抗性篩選試劑。G418能阻斷蛋白質(zhì)合成，對細菌、酵母、高等植物以及哺乳動物細胞均具有氨基糖苷類毒性，用于真核細胞從轉(zhuǎn)座子Tn5和Tn601穩(wěn)定轉(zhuǎn)染新霉su(neo)抗性基因的選擇和維持，經(jīng)常用于基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動物等方面。
NobleRyder G418 solution經(jīng)過濾除菌，一般工作濃度為50～1000ug/ml不等，不同類型的細胞需要根據(jù)實驗確定最佳濃度。在具有相對穩(wěn)定基因組的細胞(如CHO細胞)中，一旦篩選出穩(wěn)定細胞株后，無需加入G418即可繼續(xù)培養(yǎng)。
NobleRyder G418溶液(geneticin,20mg/ml)
產(chǎn)品組成：
編號 名稱 | C3802 | Storage |
G418 solution(20mg/ml) | 10ml | -20℃ 避光 |
使用說明書 | 1 | |
主要成分：主要由G418、HEPES等組成，過濾除菌。
操作步驟（僅供參考）：
1、 由于每種細胞對G418的敏感性不同，而且不同批次的G418的活性液不同，所以在篩選之前，需要確定G418的最佳篩選濃度，一般在50～1000μg/ml范圍內(nèi)進行篩選。
2、 將細胞制備成細胞懸液，并稀釋到1000個/ml。
3、 加入不同量的G418 solution (20mg/ml)，選擇在10~14天內(nèi)使細胞全部死亡的*低G418濃度來進行下一步的篩選試驗。
注意事項：
1.盡量減少反復凍融的次數(shù)，以免失效。
2.加藥篩選約5～7天左右，細胞會大量死亡，為了減少死亡細胞對陽性克隆的不利影響以及增加陽性克隆的獲得率，可以應用套環(huán)法或刮除法結(jié)合有限稀釋法來篩選陽性克隆。加藥后，在高倍鏡下，刮除陰性克隆，消化陽性克隆后繼續(xù)篩選培養(yǎng)?；蛘哂锰篆h(huán)套住陽性克隆，在套環(huán)內(nèi)加yi蛋白酶消化，把消化液吸到另外一個新的孔中培養(yǎng)，最后再用有限稀釋法把陽性克隆在96孔板中篩選。
3.注意無菌操作，盡量避免污染。
4.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期： 6個月有效。
NobleRyder G418溶液(geneticin,20mg/ml)
